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α互补筛选名解

载体带有一个大肠杆菌的DNA的短区段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和前146个氨基酸的编码信息.在这个编码区中插入了一个多克隆位点(MCS),它并不破坏读框,但可使少数几个氨基酸插入到β-半乳糖苷酶的氨基端而不

E.coli DH5α菌株带有β-半乳糖苷酶C端部分序列的编码信息. 载体质粒DNA 上带有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和β-半乳糖苷酶N端146个氨基酸的编码序列.(这个编码区中插入了一个多克隆位点,但并没有破坏lacZ

dna分子两条链上的碱基通过氢键连接成碱基对,并且碱基配对有一定的规律:a一定与t配对,g一定与c配对.碱基之间的这种一一对应的关系,叫碱基互补

α-互补,总的一句话,其用途是通过蓝白筛选鉴别重组子和非重组子.实验中,白色的是重组子,蓝色的是非重组子.知道这一点,对非基础医学研究的人已足够了. 大肠杆菌的lacZ基因上缺失近操纵基因区段的突变体与带有完整的近操纵基因区段的β-半乳糖苷酸阴性突变体之间实现互补的现象叫α-互补. 由于pUC18/pUC19质粒可表达LacZ,而外源DNA插入多克隆位点将阻碍β〖CD*2〗半乳糖苷酶氨基端片段的表达,从而破坏了α互补.因此可以用组织化学筛选法挑选重组质粒. α-互补给pUC系列的载体带来了极大的方便:载体中就没有必要包含3kb以上的β-半乳糖苷酶的编码序列.

载体pGEMZ在β-半乳糖苷酶(lacZ)的α-肽编码区内具有多克隆区域.在重组质粒中插入片段使α-肽失活,可在指示平板上通过颜色筛选鉴别.不带有插入片段的载体,表达有功能的β-半乳糖苷酶,所用的宿主菌在染色体或附加体上缺失掉lacZM

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